Azərbaycanca
Беларускі
Dansk
Deutsch
Española
Français
Indonesia
Italiana
日本語
Қазақ
Lietuvos
Nederlands
Português
Русский
සිංහල
แบบไทย
Türkçe
Українська
中國人
United State
Afrikaans
Bu madde, ; zira herhangi bir maddeden bu maddeye verilmiş bir bağlantı yoktur. (Eylül 2022) |
Hemaglütinasyon deneyi (HA) veya hemaglütinasyon inhibisyon deneyi (HI), 1941-42'de Amerikalı virolog George Hirst tarafından, virüslerin, bakterilerin (ve antijenlerin) veya antikorların nispi konsantrasyonunu ölçmek için geliştirilen deneydir.
Kırmızı kan hücrelerinin yüzeyindeki sialik asit reseptörlerinin influenza virüsünün (veya diğer antijenlerin) yüzeyinde bulunan hemaglütinin glikoproteinine bağlandığı ve birbirine bağlı alyuvarlar ve virüs parçacıklarının bir ağ (genellikle dantel benzetmesi yapılır) veya kafes yapısı oluşturduğu süreciyle uygulanan bir deney. Dantel görünümü veya kafes görünümü, normalde dağınık kırmızımsı bir çözelti olarak görülen eritrositleri askıya alınmış bir düzende tutar. Kafes oluşumu, virüslerin ve alyuvarların konsantrasyonlarına bağlıdır ve bağıl virüs konsantrasyonu çok düşük olduğunda, alyuvarlar kafes tarafından tutulamazlar ve kuyunun dibine çökerler. Virüslerin eritrositlerin aglütinasyonuna neden olmak için kullandıkları mekanizmaya benzer şekilde, stafilokoklar, vibriolar ve diğer bakteri türlerinin varlığında da hemaglütinasyon gözlenir. HA ve HI testlerinde kullanılan alyuvarlar, hedeflenen virüs veya bakterinin seçiciliğine ve alyuvar üzerindeki ilişkili yüzey reseptörlerine bağlı olarak, tavuklar, hindiler, atlar, kobaylar veya insanlardan elde edilir.
Test prosedürü
HA için genel prosedür aşağıdaki gibidir, U veya V-tabanlı 96 kuyucuklu bir mikrotitre plakasında sıralar boyunca seri bir virüs seyreltmesi hazırlanır. İlk kuyudaki en konsantre numune genellikle stoğun 1/5x'i olacak şekilde seyreltilir ve sonraki kuyucuklar tipik olarak iki kat seyreltmelerdir (1/10, 1/20, 1/40, vb.). Son kuyucuk, virüssüz bir negatif kontrol görevi görür. Plakanın her sırası tipik olarak farklı bir örneğe ve aynı seyreltme modeline sahiptir. Seri seyreltmelerden sonra, her kuyucuğa standart bir alyuvar konsantrasyonu eklenir ve yavaşça karıştırılır. Plaka, oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edilir. İnkübasyon süresinin ardından, tahlil, aglütine ve aglütine olmayan kuyucuklar arasında ayrım yapmak için analiz edilebilir. İlk sıradaki görüntüler tipik olarak yüksek virüs konsantrasyonu ve dağınık kırmızımsı bir görünüme sahiptir. Düşük konsantrasyonlu kuyucuklar, virüs içermeyen negatif kontrol kuyucuğu ile neredeyse aynı görünmektedir. Düğme görünümü, alyuvarların aglütine kafes yapısında tutulmaması ve U veya V-tabanlı kuyucuğun alt noktasına çökelmesi nedeniyle oluşur. Aglütine edilmiş kuyulardan aglütine olmamış kuyucuklara geçiş, 1 ila 2 kuyucuk içinde belirgin bir şekilde gerçekleşir.
Avantajlar
HA ve HI deneyleri, tahlillerin basit olması, nispeten ucuz olması, halihazırda bulunan alet ve malzemelerin kullanması ve birkaç saat içinde sonuç vermesi gibi avantajlara sahiptir. Tahliller aynı zamanda dünya çapında pek çok laboratuvarda rutin olarak kullanılmaktadır, güvenilirlik, kıyaslama ve standardizasyon olanağı sunmaktadır.
Sınırlılıkları
Optimal ve güvenilir sonuçlar için, inkübasyon (kuluçka) süreleri, kırmızı kan hücresi konsantrasyonu ve kırmızı kan hücresi türü gibi çeşitli değişkenlerin kontrol edilmesi gerekir. Numunedeki spesifik olmayan faktörler karışıklığa ve hatalı titre (konsantrasyon) değerlerine yol açabilir. Örneğin, virüse özgü antikorlar dışındaki numunedeki moleküller, virüs ve alyuvarlar arasındaki aglütinasyonu engelleyebilir ve ayrıca antikorun virüse bağlanmasını potansiyel olarak bloke edebilir. Reseptörü yok eden enzimler, yanlış sonuçları önlemek için analizden önce yaygın olarak numunelere tatbik edilir. HA veya HI sonuçlarının analizi, plağın okunması ve titre değerlerinin belirlenmesi için kalifiye bir kişiye ihtiyaç duyulur. Manuel yorumlama yöntemlerinin kullanılıyor olması, insandan insana farklı yorumlamaların yapılabildiği için, belli tutarsızlıklara sebep olabilmektedir. Ayrıca, plak veya titre belirlemelerinin dijital kaydı bulunmadığından, ilk yorumlama zahmetlidir (kayıt işleri vs.) ve yaygın olarak tekrar edilir. Uzman okuyucular arasındaki potansiyel değişkenlerin aralığı ve farklılıklar, laboratuvarlar arası sonuçların karşılaştırılmasını zorlaştırabilir.
Ayrıca bakınız
Kaynakça
- ^ Hirst (1942). "The quantitative determination of Influenza virus and antibodies by means of red cell agglutination". J Exp Med. 75 (1): 49-64. doi:10.1084/jem.75.1.49. (PMC) 2135212 $2. (PMID) 19871167.
- ^ "Antigenic Characterization-Flu Activity & Surveillance- Seasonal Influenza (Flu)". CDC. 15 Ekim 2019. 16 Nisan 2014 tarihinde kaynağından arşivlendi.
- ^ Neter (1954). "Studies on Bacterial Hemagglutination". American Journal of Public Health. 44 (1): 49-54. doi:10.2105/ajph.44.1.49. (PMC) 1620628 $2. (PMID) 13114484.
- ^ Neter (1956). "Bacterial Hemagglutination and Hemolysis". Statler Research Laboratories and Department of Pediatrics, Children's Hospital, Laboratory of Bacteriology, Roswell Park Memorial Institute, and Departments of Pediatrics and Bacteriology, University of Buffalo, School of Medicine, Buffalo, New York. 20 (3): 166-182. (PMC) 180858 $2. (PMID) 13363771.
- ^ "Serological detection of avian Influenza A (H7N9) virus infections by turkey haemagglutination-inhibition assay- Laboratory Procedures" (PDF). WHO. 16 Haziran 2013 tarihinde kaynağından (PDF) arşivlendi.
- ^ "An Overview of virus quantification techniques" (PDF). Virocyt. 3 Mart 2016 tarihinde kaynağından (PDF) arşivlendi. Erişim tarihi: 8 Haziran 2015.
- ^ Noah (2009). "Qualification of the Hemagglutination Inhibition Assay in Support of Pandemic Influenza Vaccine Licensure". Clin Vaccine Immunology. 16 (4): 558-566. doi:10.1128/cvi.00368-08. (PMC) 2668270 $2. (PMID) 19225073.
- ^ "Serological detection of avian Influenza A (H7N9) virus infections by turkey haemagglutination-inhibition assay- Laboratory Procedures" (PDF). WHO. 16 Haziran 2013 tarihinde kaynağından (PDF) arşivlendi.
- ^ "Serological detection of avian Influenza A (H7N9) virus infections by turkey haemagglutination-inhibition assay- Laboratory Procedures" (PDF). WHO. 16 Haziran 2013 tarihinde kaynağından (PDF) arşivlendi.
- ^ Wood (September 2013). "A Comparative Examination of Influenza Haemagglutination-Inhibition Assay Protocols – Development of a Consensus HI Protocol" (4th International Meeting). CONSISE.
- ^ Wood (2012). "Reproducibility of serology assays for pandemic influenza H1N1: Collaborative study to evaluate a candidate WHO International Standard". Vaccine. 30 (2): 210-217. doi:10.1016/j.vaccine.2011.11.019. (PMID) 22100887.
wikipedia, wiki, viki, vikipedia, oku, kitap, kütüphane, kütübhane, ara, ara bul, bul, herşey, ne arasanız burada,hikayeler, makale, kitaplar, öğren, wiki, bilgi, tarih, yukle, izle, telefon için, turk, türk, türkçe, turkce, nasıl yapılır, ne demek, nasıl, yapmak, yapılır, indir, ücretsiz, ücretsiz indir, bedava, bedava indir, mp3, video, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, resim, müzik, şarkı, film, film, oyun, oyunlar, mobil, cep telefonu, telefon, android, ios, apple, samsung, iphone, xiomi, xiaomi, redmi, honor, oppo, nokia, sonya, mi, pc, web, computer, bilgisayar
Bu madde oksuz maddedir zira herhangi bir maddeden bu maddeye verilmis bir baglanti yoktur Lutfen ilgili maddelerden bu sayfaya baglanti vermeye calisin Eylul 2022 Hemaglutinasyon deneyi HA veya hemaglutinasyon inhibisyon deneyi HI 1941 42 de Amerikali virolog George Hirst tarafindan viruslerin bakterilerin ve antijenlerin veya antikorlarin nispi konsantrasyonunu olcmek icin gelistirilen deneydir Soldan saga seyreltilmis farkli influenza orneklerinin hemaglutinasyon testi Insan ekinokokkozu icin indirekt hemaglutinasyon testi Soldan saga dogru seyreltilmis farkli serum ornekleri Ornek 179 da seropozitiflikten suphelenilmistir Kirmizi kan hucrelerinin yuzeyindeki sialik asit reseptorlerinin influenza virusunun veya diger antijenlerin yuzeyinde bulunan hemaglutinin glikoproteinine baglandigi ve birbirine bagli alyuvarlar ve virus parcaciklarinin bir ag genellikle dantel benzetmesi yapilir veya kafes yapisi olusturdugu sureciyle uygulanan bir deney Dantel gorunumu veya kafes gorunumu normalde daginik kirmizimsi bir cozelti olarak gorulen eritrositleri askiya alinmis bir duzende tutar Kafes olusumu viruslerin ve alyuvarlarin konsantrasyonlarina baglidir ve bagil virus konsantrasyonu cok dusuk oldugunda alyuvarlar kafes tarafindan tutulamazlar ve kuyunun dibine cokerler Viruslerin eritrositlerin aglutinasyonuna neden olmak icin kullandiklari mekanizmaya benzer sekilde stafilokoklar vibriolar ve diger bakteri turlerinin varliginda da hemaglutinasyon gozlenir HA ve HI testlerinde kullanilan alyuvarlar hedeflenen virus veya bakterinin seciciligine ve alyuvar uzerindeki iliskili yuzey reseptorlerine bagli olarak tavuklar hindiler atlar kobaylar veya insanlardan elde edilir Test proseduruHA icin genel prosedur asagidaki gibidir U veya V tabanli 96 kuyucuklu bir mikrotitre plakasinda siralar boyunca seri bir virus seyreltmesi hazirlanir Ilk kuyudaki en konsantre numune genellikle stogun 1 5x i olacak sekilde seyreltilir ve sonraki kuyucuklar tipik olarak iki kat seyreltmelerdir 1 10 1 20 1 40 vb Son kuyucuk virussuz bir negatif kontrol gorevi gorur Plakanin her sirasi tipik olarak farkli bir ornege ve ayni seyreltme modeline sahiptir Seri seyreltmelerden sonra her kuyucuga standart bir alyuvar konsantrasyonu eklenir ve yavasca karistirilir Plaka oda sicakliginda 30 dakika inkube edilir Inkubasyon suresinin ardindan tahlil aglutine ve aglutine olmayan kuyucuklar arasinda ayrim yapmak icin analiz edilebilir Ilk siradaki goruntuler tipik olarak yuksek virus konsantrasyonu ve daginik kirmizimsi bir gorunume sahiptir Dusuk konsantrasyonlu kuyucuklar virus icermeyen negatif kontrol kuyucugu ile neredeyse ayni gorunmektedir Dugme gorunumu alyuvarlarin aglutine kafes yapisinda tutulmamasi ve U veya V tabanli kuyucugun alt noktasina cokelmesi nedeniyle olusur Aglutine edilmis kuyulardan aglutine olmamis kuyucuklara gecis 1 ila 2 kuyucuk icinde belirgin bir sekilde gerceklesir AvantajlarHA ve HI deneyleri tahlillerin basit olmasi nispeten ucuz olmasi halihazirda bulunan alet ve malzemelerin kullanmasi ve birkac saat icinde sonuc vermesi gibi avantajlara sahiptir Tahliller ayni zamanda dunya capinda pek cok laboratuvarda rutin olarak kullanilmaktadir guvenilirlik kiyaslama ve standardizasyon olanagi sunmaktadir SinirliliklariOptimal ve guvenilir sonuclar icin inkubasyon kulucka sureleri kirmizi kan hucresi konsantrasyonu ve kirmizi kan hucresi turu gibi cesitli degiskenlerin kontrol edilmesi gerekir Numunedeki spesifik olmayan faktorler karisikliga ve hatali titre konsantrasyon degerlerine yol acabilir Ornegin viruse ozgu antikorlar disindaki numunedeki molekuller virus ve alyuvarlar arasindaki aglutinasyonu engelleyebilir ve ayrica antikorun viruse baglanmasini potansiyel olarak bloke edebilir Reseptoru yok eden enzimler yanlis sonuclari onlemek icin analizden once yaygin olarak numunelere tatbik edilir HA veya HI sonuclarinin analizi plagin okunmasi ve titre degerlerinin belirlenmesi icin kalifiye bir kisiye ihtiyac duyulur Manuel yorumlama yontemlerinin kullaniliyor olmasi insandan insana farkli yorumlamalarin yapilabildigi icin belli tutarsizliklara sebep olabilmektedir Ayrica plak veya titre belirlemelerinin dijital kaydi bulunmadigindan ilk yorumlama zahmetlidir kayit isleri vs ve yaygin olarak tekrar edilir Uzman okuyucular arasindaki potansiyel degiskenlerin araligi ve farkliliklar laboratuvarlar arasi sonuclarin karsilastirilmasini zorlastirabilir Ayrica bakinizKaynakca Hirst 1942 The quantitative determination of Influenza virus and antibodies by means of red cell agglutination J Exp Med 75 1 49 64 doi 10 1084 jem 75 1 49 PMC 2135212 2 PMID 19871167 Antigenic Characterization Flu Activity amp Surveillance Seasonal Influenza Flu CDC 15 Ekim 2019 16 Nisan 2014 tarihinde kaynagindan arsivlendi Neter 1954 Studies on Bacterial Hemagglutination American Journal of Public Health 44 1 49 54 doi 10 2105 ajph 44 1 49 PMC 1620628 2 PMID 13114484 Neter 1956 Bacterial Hemagglutination and Hemolysis Statler Research Laboratories and Department of Pediatrics Children s Hospital Laboratory of Bacteriology Roswell Park Memorial Institute and Departments of Pediatrics and Bacteriology University of Buffalo School of Medicine Buffalo New York 20 3 166 182 PMC 180858 2 PMID 13363771 Serological detection of avian Influenza A H7N9 virus infections by turkey haemagglutination inhibition assay Laboratory Procedures PDF WHO 16 Haziran 2013 tarihinde kaynagindan PDF arsivlendi An Overview of virus quantification techniques PDF Virocyt 3 Mart 2016 tarihinde kaynagindan PDF arsivlendi Erisim tarihi 8 Haziran 2015 Noah 2009 Qualification of the Hemagglutination Inhibition Assay in Support of Pandemic Influenza Vaccine Licensure Clin Vaccine Immunology 16 4 558 566 doi 10 1128 cvi 00368 08 PMC 2668270 2 PMID 19225073 Serological detection of avian Influenza A H7N9 virus infections by turkey haemagglutination inhibition assay Laboratory Procedures PDF WHO 16 Haziran 2013 tarihinde kaynagindan PDF arsivlendi Serological detection of avian Influenza A H7N9 virus infections by turkey haemagglutination inhibition assay Laboratory Procedures PDF WHO 16 Haziran 2013 tarihinde kaynagindan PDF arsivlendi Wood September 2013 A Comparative Examination of Influenza Haemagglutination Inhibition Assay Protocols Development of a Consensus HI Protocol 4th International Meeting CONSISE Wood 2012 Reproducibility of serology assays for pandemic influenza H1N1 Collaborative study to evaluate a candidate WHO International Standard Vaccine 30 2 210 217 doi 10 1016 j vaccine 2011 11 019 PMID 22100887