Kalsiyum görüntüleme tekniği hücre, doku ya da ortamdaki kalsiyum (Ca2+) durumunu görüntülemek amacıyla kullanılan bir bilimsel teknik. Kalsiyum görüntüleme teknikleri floresan özelliği taşıyan, fakat Ca2+ ile bağlandığında floresan özelliği değişen kalsiyum belirteçlerinden faydalanır. İki temel tip kalsiyum belirteci mevcuttur: kimyasal belirteçler ve genetik olarak kodlanmış belirteçler. Kalsiyum görüntüleme, canlı hayvanlarda hücre içi kalsiyumu optik olarak görüntülemek için kullanılabilir. Bu teknik geniş çapta hücre tipinin ve sinir devrelerindeki yüzlerce gliya hücrelerinin ve sinir hücrelerinin sinirsel aktivite görüntüleme çalışmalarına izin verir.
Kimyasal belirteçler
Kimyasal belirteçler kalsiyum iyonları ile şelat oluşturabilen küçük moleküllerdir. Tüm bu moleküller olarak bilinen homoloğunu magnezyum (Mg2+) iyonlarına karşı yüksek kalsiyum (Ca2+) seçiciliğini temel alır.
Bu gruptaki göstergeler , , , , 'i içerir.
Bu boyalar sık sık asetoksimetil ester olarak maskelenen şelatör karboksil gruplar ile kullanılır, böylece molekül lipofilik olur ve hücreye girişi kolaylaşır. Bu haldeki belirteç hücreye girdikten sonra hücresel esterazlar karboksil grupları serbest bırakır ve belirteç kalsiyuma bağlanabilir. Boyaların serbest asit formu (asetoksimetil ester modifikasyonu olmayan hali) veya yardımıyla hücrelere doğrudan enjekte edilebilir, böylece hücrelerin hangi bölümünün boya tuttuğuyla ilgili belirsizlikler giderilebilir (asetoksimetil ester ayrıca endoplazmik retikulum ve mitokondriye de girer). Ca2+ iyonunun floresan belirteci moleküle bağlanması floresanın artışa ya da ışıma/uyarım dalga boyunda kaymaya sebep olur. Tekil kimyasal Ca2+ floresan belirteçleri çeşitli hücresel hazırlıklarda sitozolik kalsiyum ölçümleri için kullanılır. İlk gerçek zamanlı (video hızı) Ca2+ görüntülemesi 1986 yılında kalp hücrelerinde yoğun video kameralar kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Tekniğin bir sonraki gelişiminde lazer tarayıcılı konfokal mikroskoplar kullanılarak hücre altı Ca2+ sinyallerinin ve Ca2+ biplemesi ürettiği ortaya çıkmıştır. Kimyasal Ca2+ floresan belirteçlerin kombinasyonundan alınan göreceli yanıtlar ayrıca mitokondri gibi hücre içi organellerdeki geçici kalsiyum miktarını belirlemek için kullanılmıştır.
Kalsiyum haritalama olarak da bilinen kalsiyum görüntüleme, ayrıca miyokardiyal doku üzerinde araştırma yapmak için de kullanılır. Kalsiyum haritalama bütün olarak fare, sıçan ve tavşan gibi türlerin izole kalpleri üzerinde uygulanabilen bir tekniktir.
Genetik olarak kodlanmış kalsiyum belirteci
Bu belirteçler, (GFP) veya onun türevlerinin (örneğin dairesel değiştirilmiş GFP, YFP, CFP), (CaM) ve CaM'e bağlanabilen M13 etki alanı ile iç içe geçmesi ile türetilmiş floresan proteinlerdir. Alternatif olarak, GFP türevleri kalsiyum bağlayıcı protein troponin C (TnC) ile iç içe geçer ve mekanizmasını sinyal modülasyonu amacıyla kullanır.
Genetik olarak kodlanmış belirteçlerin hücreler üzerine yüklenmesine gerek yoktur, bunun yerine bu proteinleri okuyan genler kolayca hücre hatlarından hücre içine alabilir. Ayrıca boyanın tüm hücrelerde gösterilmesini ya da seçici olarak belli hücre alt tiplerinde gösterilmesini sağlayan transgenik hayvanların üretimi de mümkündür. GECIler nöron,T-hücreleri, , vb. çalışmalarda kullanılmaktadır.
GECİ | Yıl | Algılama | Raporlama | Öncü |
---|---|---|---|---|
Cameleons | 1997 | Kalmodulin | FRET çifti: BFP veya CFP ve GFP veya YFP | - |
FIP-CBSM | 1997 | Kalmodulin | FRET çifti: BFP ve RFP | - |
Pericams | 2000 | Kalmodulin | cpGFP | - |
GCaMP | 2000 | Kalmodulin | cpEGFP | - |
TN-L15 | 2004 | Değiştirilmiş tavuk kası troponin C | FRET çifti: YFP (Sitrin) ve CFP (Cerulean) | - |
TN-humTnC | 2004 | İnsan kardiyak troponin C | FRET çifti: YFP (Sitrin) ve CFP (Cerulean) | - |
TN-XL | 2006 | Değiştirilmiş tavuk kası troponin C | FRET çifti: sırası değiştirilmiş YFP (Sitrin) ve CFP (Cerulean) | TN-L15 |
TN-XXL | 2008 | TN-XL modifiye csTnC | FRET çifti: sırası değiştirilmiş YFP (Sitrin) ve CFP (Cerulean) | TN-XL |
Twitch'in | 2014 | Troponin C | FRET çifti (değişik iki FP) | - |
Kullanımı
Belirteç türü ne olursa olsun görüntüleme prosedürü genellikle çok benzerdir. Belirteçle yüklü ya da GECI durumunda gösteren hücreler floresan mikroskobu ile gözlemlenebilir ve bir CCD kamera ile kaydedilebilir. ve iki fotonlu mikroskoplar geliştirilmiş kesit alma yeteneği sağlayabilir, böylece kalsiyum sinyalleri mikro etki alanında ya da (örneğin) çözümlenebilir. Görüntüler floresan yoğunluğu değişimlerinin tek ya da çift dalgaboyunda oransal olarak (oransal belirteçler) gösterdiklerinin ölçülmesiyle analiz edilir. Türetilmiş floresan yoğunlukları ve oranları, bilinen Ca2+ düzeylerinin kalibre edilmiş oranlarına karşı çizilir ve Ca2+ konsantrasyonu öğrenilir. Işık alan mikroskopi yöntemleri 3D birimlerde sinirsel aktivite kapasitesinin fonksiyonel okunumuna kadar genişler.
Kaynakça
- ^ Stosiek, Christoph; Garaschuk, Olga; Holthoff, Knut; Konnerth, Arthur (2003). "In vivo two-photon calcium imaging of neuronal networks". Proceedings of the National Academy of Sciences. 100 (12). ss. 7319-24. Bibcode:2003PNAS..100.7319S. doi:10.1073/pnas.1232232100. JSTOR 3139475. (PMC) 165873 $2. (PMID) 12777621.
- ^ Cannell, M. B.; Berlin, J. R.; Lederer, W. J. (1 Ocak 1987). "Intracellular calcium in cardiac myocytes: calcium transients measured using fluorescence imaging". Society of General Physiologists Series. Cilt 42. ss. 201-214. ISSN 0094-7733. (PMID) 3505361.
- ^ Ivannikov, Maxim V.; Macleod, Gregory T. (2013). "Mitochondrial Free Ca2+ Levels and Their Effects on Energy Metabolism in Drosophila Motor Nerve Terminals". Biophysical Journal. 104 (11). ss. 2353-61. doi:10.1016/j.bpj.2013.03.064. (PMC) 3672877 $2. (PMID) 23746507.
- ^ Jaimes, Rafael; Walton, Richard D.; Pasdois, Phillipe Lionel Claude; Bernus, Olivier; Efimov, Igor R.; Kay, Matthew W (2016). "A Technical Review of Optical Mapping of Intracellular Calcium within Myocardial Tissue". American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. Cilt 310. ss. ajpheart.00665.2015. doi:10.1152/ajpheart.00665.2015. (PMID) 27016580.
- ^ Kavalchuk, Yury; Homma, Ryota; Liang, Yajie; Maslyukov, Anatoliy; Hermes, Marina; Thestrup, Thomas; Griesbeck, Oliver; Ninkovic, Jovica; Cohen, Lawrence B. (19 Şubat 2015). "In vivo odourant response properties of migrating adult-born neurons in the mouse olfactory bulb". Nature Communications. Cilt 6. s. 6349. doi:10.1038/ncomms7349. ISSN 2041-1723. (PMID) 25695931.
- ^ Mues, Marsilius; Bartholomäus, Ingo; Thestrup, Thomas; Griesbeck, Oliver; Wekerle, Hartmut; Kawakami, Naoto; Krishnamoorthy, Gurumoorthy (1 Haziran 2013). "Real-time in vivo analysis of T cell activation in the central nervous system using a genetically encoded calcium indicator". Nature Medicine. 19 (6). ss. 778-783. doi:10.1038/nm.3180. ISSN 1546-170X. (PMID) 23685843.
- ^ Shinnawi, R; Huber, I; Maizels, L; Shaheen, N; Gepstein, A; Arbel, G; Tijsen, A; Gepstein, L (2015). "Monitoring human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes with genetically encoded calcium and voltage fluorescent reporters". Stem Cell Reports. 5 (4). ss. 582-596. doi:10.1016/j.stemcr.2015.08.009. (PMC) 4624957 $2. (PMID) 26372632.
- ^ Miyawaki, A.; Llopis, J.; Heim, R.; McCaffery, J. M.; Adams, J. A.; Ikura, M.; Tsien, R. Y. (28 Ağustos 1997). "Fluorescent indicators for Ca2+ based on green fluorescent proteins and calmodulin". Nature. 388 (6645). ss. 882-887. doi:10.1038/42264. ISSN 0028-0836. (PMID) 9278050.
- ^ Romoser, V. A.; Hinkle, P. M.; Persechini, A. (16 Mayıs 1997). "Detection in living cells of Ca2+-dependent changes in the fluorescence emission of an indicator composed of two green fluorescent protein variants linked by a calmodulin-binding sequence. A new class of fluorescent indicators". The Journal of Biological Chemistry. 272 (20). ss. 13270-13274. ISSN 0021-9258. (PMID) 9148946.
- ^ Nagai, T.; Sawano, A.; Park, E. S.; Miyawaki, A. (13 Mart 2001). "Circularly permuted green fluorescent proteins engineered to sense Ca2+". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98 (6). ss. 3197-3202. doi:10.1073/pnas.051636098. ISSN 0027-8424. (PMC) 30630 $2. (PMID) 11248055.
- ^ Nakai, J.; Ohkura, M.; Imoto, K. (1 Şubat 2001). "A high signal-to-noise Ca(2+) probe composed of a single green fluorescent protein". Nature Biotechnology. 19 (2). ss. 137-141. doi:10.1038/84397. ISSN 1087-0156. (PMID) 11175727.
- ^ Heim, Nicola; Griesbeck, Oliver (2 Nisan 2004). "Genetically encoded indicators of cellular calcium dynamics based on troponin C and green fluorescent protein". The Journal of Biological Chemistry. 279 (14). ss. 14280-14286. doi:10.1074/jbc.M312751200. ISSN 0021-9258. (PMID) 14742421.
- ^ Mank, Marco; Reiff, Dierk F.; Heim, Nicola; Friedrich, Michael W.; Borst, Alexander; Griesbeck, Oliver (1 Mart 2006). "A FRET-based calcium biosensor with fast signal kinetics and high fluorescence change". Biophysical Journal. 90 (5). ss. 1790-1796. doi:10.1529/biophysj.105.073536. ISSN 0006-3495. (PMC) 1367327 $2. (PMID) 16339891.
- ^ Mank, Marco; Santos, Alexandre Ferrão; Direnberger, Stephan; Mrsic-Flogel, Thomas D.; Hofer, Sonja B.; Stein, Valentin; Hendel, Thomas; Reiff, Dierk F.; Levelt, Christiaan (1 Eylül 2008). "A genetically encoded calcium indicator for chronic in vivo two-photon imaging". Nature Methods. 5 (9). ss. 805-811. doi:10.1038/nmeth.1243. ISSN 1548-7091. (PMID) 19160515.
- ^ Thestrup, Thomas; Litzlbauer, Julia; Bartholomäus, Ingo; Mues, Marsilius; Russo, Luigi; Dana, Hod; Kovalchuk, Yuri; Liang, Yajie; Kalamakis, Georgios (1 Şubat 2014). "Optimized ratiometric calcium sensors for functional in vivo imaging of neurons and T lymphocytes". Nature Methods. 11 (2). ss. 175-182. doi:10.1038/nmeth.2773. ISSN 1548-7105. (PMID) 24390440.
- ^ Pégard, N.; Liu, H.; Antipa, N; Gerlock, M.; Adesnik, H.; Waller, L. (2016). "Compressive light-field microscopy for 3D neural activity recording". Optica. Cilt 3. ss. 517-524. 27 Aralık 2017 tarihinde kaynağından .
Konuyla ilgili yayınlar
- "A Practical guide to the study of calcium in living cells". Boston: Academic Press. 1994. ISBN . 1 Ocak 2018 tarihinde kaynağından .
wikipedia, wiki, viki, vikipedia, oku, kitap, kütüphane, kütübhane, ara, ara bul, bul, herşey, ne arasanız burada,hikayeler, makale, kitaplar, öğren, wiki, bilgi, tarih, yukle, izle, telefon için, turk, türk, türkçe, turkce, nasıl yapılır, ne demek, nasıl, yapmak, yapılır, indir, ücretsiz, ücretsiz indir, bedava, bedava indir, mp3, video, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, resim, müzik, şarkı, film, film, oyun, oyunlar, mobil, cep telefonu, telefon, android, ios, apple, samsung, iphone, xiomi, xiaomi, redmi, honor, oppo, nokia, sonya, mi, pc, web, computer, bilgisayar
Kalsiyum goruntuleme teknigi hucre doku ya da ortamdaki kalsiyum Ca2 durumunu goruntulemek amaciyla kullanilan bir bilimsel teknik Kalsiyum goruntuleme teknikleri floresan ozelligi tasiyan fakat Ca2 ile baglandiginda floresan ozelligi degisen kalsiyum belirteclerinden faydalanir Iki temel tip kalsiyum belirteci mevcuttur kimyasal belirtecler ve genetik olarak kodlanmis belirtecler Kalsiyum goruntuleme canli hayvanlarda hucre ici kalsiyumu optik olarak goruntulemek icin kullanilabilir Bu teknik genis capta hucre tipinin ve sinir devrelerindeki yuzlerce gliya hucrelerinin ve sinir hucrelerinin sinirsel aktivite goruntuleme calismalarina izin verir Kimyasal belirteclerKimyasal belirtecler kalsiyum iyonlari ile selat olusturabilen kucuk molekullerdir Tum bu molekuller olarak bilinen homologunu magnezyum Mg2 iyonlarina karsi yuksek kalsiyum Ca2 seciciligini temel alir Bu gruptaki gostergeler i icerir Bu boyalar sik sik asetoksimetil ester olarak maskelenen selator karboksil gruplar ile kullanilir boylece molekul lipofilik olur ve hucreye girisi kolaylasir Bu haldeki belirtec hucreye girdikten sonra hucresel esterazlar karboksil gruplari serbest birakir ve belirtec kalsiyuma baglanabilir Boyalarin serbest asit formu asetoksimetil ester modifikasyonu olmayan hali veya yardimiyla hucrelere dogrudan enjekte edilebilir boylece hucrelerin hangi bolumunun boya tuttuguyla ilgili belirsizlikler giderilebilir asetoksimetil ester ayrica endoplazmik retikulum ve mitokondriye de girer Ca2 iyonunun floresan belirteci molekule baglanmasi floresanin artisa ya da isima uyarim dalga boyunda kaymaya sebep olur Tekil kimyasal Ca2 floresan belirtecleri cesitli hucresel hazirliklarda sitozolik kalsiyum olcumleri icin kullanilir Ilk gercek zamanli video hizi Ca2 goruntulemesi 1986 yilinda kalp hucrelerinde yogun video kameralar kullanilarak gerceklestirilmistir Teknigin bir sonraki gelisiminde lazer tarayicili konfokal mikroskoplar kullanilarak hucre alti Ca2 sinyallerinin ve Ca2 biplemesi urettigi ortaya cikmistir Kimyasal Ca2 floresan belirteclerin kombinasyonundan alinan goreceli yanitlar ayrica mitokondri gibi hucre ici organellerdeki gecici kalsiyum miktarini belirlemek icin kullanilmistir Kalsiyum haritalama olarak da bilinen kalsiyum goruntuleme ayrica miyokardiyal doku uzerinde arastirma yapmak icin de kullanilir Kalsiyum haritalama butun olarak fare sican ve tavsan gibi turlerin izole kalpleri uzerinde uygulanabilen bir tekniktir Genetik olarak kodlanmis kalsiyum belirteciBu belirtecler GFP veya onun turevlerinin ornegin dairesel degistirilmis GFP YFP CFP CaM ve CaM e baglanabilen M13 etki alani ile ic ice gecmesi ile turetilmis floresan proteinlerdir Alternatif olarak GFP turevleri kalsiyum baglayici protein troponin C TnC ile ic ice gecer ve mekanizmasini sinyal modulasyonu amaciyla kullanir Genetik olarak kodlanmis belirteclerin hucreler uzerine yuklenmesine gerek yoktur bunun yerine bu proteinleri okuyan genler kolayca hucre hatlarindan hucre icine alabilir Ayrica boyanin tum hucrelerde gosterilmesini ya da secici olarak belli hucre alt tiplerinde gosterilmesini saglayan transgenik hayvanlarin uretimi de mumkundur GECIler noron T hucreleri vb calismalarda kullanilmaktadir GECI Yil Algilama Raporlama OncuCameleons 1997 Kalmodulin FRET cifti BFP veya CFP ve GFP veya YFP FIP CBSM 1997 Kalmodulin FRET cifti BFP ve RFP Pericams 2000 Kalmodulin cpGFP GCaMP 2000 Kalmodulin cpEGFP TN L15 2004 Degistirilmis tavuk kasi troponin C FRET cifti YFP Sitrin ve CFP Cerulean TN humTnC 2004 Insan kardiyak troponin C FRET cifti YFP Sitrin ve CFP Cerulean TN XL 2006 Degistirilmis tavuk kasi troponin C FRET cifti sirasi degistirilmis YFP Sitrin ve CFP Cerulean TN L15TN XXL 2008 TN XL modifiye csTnC FRET cifti sirasi degistirilmis YFP Sitrin ve CFP Cerulean TN XLTwitch in 2014 Troponin C FRET cifti degisik iki FP KullanimiBelirtec turu ne olursa olsun goruntuleme proseduru genellikle cok benzerdir Belirtecle yuklu ya da GECI durumunda gosteren hucreler floresan mikroskobu ile gozlemlenebilir ve bir CCD kamera ile kaydedilebilir ve iki fotonlu mikroskoplar gelistirilmis kesit alma yetenegi saglayabilir boylece kalsiyum sinyalleri mikro etki alaninda ya da ornegin cozumlenebilir Goruntuler floresan yogunlugu degisimlerinin tek ya da cift dalgaboyunda oransal olarak oransal belirtecler gosterdiklerinin olculmesiyle analiz edilir Turetilmis floresan yogunluklari ve oranlari bilinen Ca2 duzeylerinin kalibre edilmis oranlarina karsi cizilir ve Ca2 konsantrasyonu ogrenilir Isik alan mikroskopi yontemleri 3D birimlerde sinirsel aktivite kapasitesinin fonksiyonel okunumuna kadar genisler Kaynakca Stosiek Christoph Garaschuk Olga Holthoff Knut Konnerth Arthur 2003 In vivo two photon calcium imaging of neuronal networks Proceedings of the National Academy of Sciences 100 12 ss 7319 24 Bibcode 2003PNAS 100 7319S doi 10 1073 pnas 1232232100 JSTOR 3139475 PMC 165873 2 PMID 12777621 Cannell M B Berlin J R Lederer W J 1 Ocak 1987 Intracellular calcium in cardiac myocytes calcium transients measured using fluorescence imaging Society of General Physiologists Series Cilt 42 ss 201 214 ISSN 0094 7733 PMID 3505361 Ivannikov Maxim V Macleod Gregory T 2013 Mitochondrial Free Ca2 Levels and Their Effects on Energy Metabolism in Drosophila Motor Nerve Terminals Biophysical Journal 104 11 ss 2353 61 doi 10 1016 j bpj 2013 03 064 PMC 3672877 2 PMID 23746507 Jaimes Rafael Walton Richard D Pasdois Phillipe Lionel Claude Bernus Olivier Efimov Igor R Kay Matthew W 2016 A Technical Review of Optical Mapping of Intracellular Calcium within Myocardial Tissue American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology Cilt 310 ss ajpheart 00665 2015 doi 10 1152 ajpheart 00665 2015 PMID 27016580 Kavalchuk Yury Homma Ryota Liang Yajie Maslyukov Anatoliy Hermes Marina Thestrup Thomas Griesbeck Oliver Ninkovic Jovica Cohen Lawrence B 19 Subat 2015 In vivo odourant response properties of migrating adult born neurons in the mouse olfactory bulb Nature Communications Cilt 6 s 6349 doi 10 1038 ncomms7349 ISSN 2041 1723 PMID 25695931 Mues Marsilius Bartholomaus Ingo Thestrup Thomas Griesbeck Oliver Wekerle Hartmut Kawakami Naoto Krishnamoorthy Gurumoorthy 1 Haziran 2013 Real time in vivo analysis of T cell activation in the central nervous system using a genetically encoded calcium indicator Nature Medicine 19 6 ss 778 783 doi 10 1038 nm 3180 ISSN 1546 170X PMID 23685843 Shinnawi R Huber I Maizels L Shaheen N Gepstein A Arbel G Tijsen A Gepstein L 2015 Monitoring human induced pluripotent stem cell derived cardiomyocytes with genetically encoded calcium and voltage fluorescent reporters Stem Cell Reports 5 4 ss 582 596 doi 10 1016 j stemcr 2015 08 009 PMC 4624957 2 PMID 26372632 Miyawaki A Llopis J Heim R McCaffery J M Adams J A Ikura M Tsien R Y 28 Agustos 1997 Fluorescent indicators for Ca2 based on green fluorescent proteins and calmodulin Nature 388 6645 ss 882 887 doi 10 1038 42264 ISSN 0028 0836 PMID 9278050 Romoser V A Hinkle P M Persechini A 16 Mayis 1997 Detection in living cells of Ca2 dependent changes in the fluorescence emission of an indicator composed of two green fluorescent protein variants linked by a calmodulin binding sequence A new class of fluorescent indicators The Journal of Biological Chemistry 272 20 ss 13270 13274 ISSN 0021 9258 PMID 9148946 Nagai T Sawano A Park E S Miyawaki A 13 Mart 2001 Circularly permuted green fluorescent proteins engineered to sense Ca2 Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 98 6 ss 3197 3202 doi 10 1073 pnas 051636098 ISSN 0027 8424 PMC 30630 2 PMID 11248055 Nakai J Ohkura M Imoto K 1 Subat 2001 A high signal to noise Ca 2 probe composed of a single green fluorescent protein Nature Biotechnology 19 2 ss 137 141 doi 10 1038 84397 ISSN 1087 0156 PMID 11175727 Heim Nicola Griesbeck Oliver 2 Nisan 2004 Genetically encoded indicators of cellular calcium dynamics based on troponin C and green fluorescent protein The Journal of Biological Chemistry 279 14 ss 14280 14286 doi 10 1074 jbc M312751200 ISSN 0021 9258 PMID 14742421 Mank Marco Reiff Dierk F Heim Nicola Friedrich Michael W Borst Alexander Griesbeck Oliver 1 Mart 2006 A FRET based calcium biosensor with fast signal kinetics and high fluorescence change Biophysical Journal 90 5 ss 1790 1796 doi 10 1529 biophysj 105 073536 ISSN 0006 3495 PMC 1367327 2 PMID 16339891 Mank Marco Santos Alexandre Ferrao Direnberger Stephan Mrsic Flogel Thomas D Hofer Sonja B Stein Valentin Hendel Thomas Reiff Dierk F Levelt Christiaan 1 Eylul 2008 A genetically encoded calcium indicator for chronic in vivo two photon imaging Nature Methods 5 9 ss 805 811 doi 10 1038 nmeth 1243 ISSN 1548 7091 PMID 19160515 Thestrup Thomas Litzlbauer Julia Bartholomaus Ingo Mues Marsilius Russo Luigi Dana Hod Kovalchuk Yuri Liang Yajie Kalamakis Georgios 1 Subat 2014 Optimized ratiometric calcium sensors for functional in vivo imaging of neurons and T lymphocytes Nature Methods 11 2 ss 175 182 doi 10 1038 nmeth 2773 ISSN 1548 7105 PMID 24390440 Pegard N Liu H Antipa N Gerlock M Adesnik H Waller L 2016 Compressive light field microscopy for 3D neural activity recording Optica Cilt 3 ss 517 524 27 Aralik 2017 tarihinde kaynagindan Konuyla ilgili yayinlar A Practical guide to the study of calcium in living cells Boston Academic Press 1994 ISBN 978 0 12 564141 8 1 Ocak 2018 tarihinde kaynagindan